EliGene® Tick-borne diseases RT (CE-IVD)

Účel použití

Souprava EliGene® Tick-borne diseases RT slouží k DNA diagnostice patogenních druhů borélií Borrelia spielmanii, B. afzelii, B. garinii, B. valaisiana, B. burgdorferi s. s., dále baktérie Anaplasma phagocytophilum a viru klíšťové encefalitidy (TBEV) z izolované nukleové kyseliny.

Princip metody

Diagnostická souprava je založena na principu RealTime PCR. Pro detekci DNA jsou použity specifické primery a duálně značené fluorescenční sondy. Pro jednotlivé patogeny jsou použity kanály FAM, Texas Red, Cy5 a pro interní kontrolu kanál HEX.

Kompatibilní přístroje

Následující seznam představuje přístroje, na kterých byl testován výše uvedený kit. Pro informace ohledně kompatibility s dalšími přístroji nás prosím kontaktujte.

• Thermofisher Scientific: Quant Studio 5
• Bio-Rad: CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System
• Bio Molecular Systems: MIC qPCR Cycler

Klinický materiál a doporučená izolace NK

Krev, moč, mozkomíšní mok, synoviální tekutina, tkáně

Manuální: Quick-DNA/RNA Miniprep Plus Kit (Zymo Research)

Automatická: ZEPHYRUS Magneto (ELISABETH PHARMACON)

Klíšťata

Obecné informace

Borelióza je onemocnění způsobené spirochétou Borrelia burgdorferi sensu lato. Průkaz této bakterie je možný z jakéhokoliv klinického materiálu pomocí DNA diagnostiky. V České republice se vyskytují patogenní druhy borélií: Borrelia spielmanii, B. afzelii, B. garinii, B. valaisiana, B. burgdorferi s. s. (Bonczek et al., 2015). Souprava EliGene® Tick-borne diseases RT obsahuje směs primerů a prób, které jsou specifické ke zmíněným pěti druhům borélií s vysokou senzitivitou – zachytí 1 – 10 borélií v 5 μl DNA izolátu. DNA diagnostiku je vhodné použít v případě podezření na boreliózu (v anamnéze přisáté klíště nebo pobodání krev sajícím hmyzem).

Z klinických vzorků pro diagnostiku lze doporučit:

a) celou krev do EDTA (pouze v případě teplot a akutní fáze onemocnění)
b) moč
c) mozkomíšní mok (v případě neuroboreliózy)
d) synoviální tekutinu
e) tkáně (kožní biopsie)

Anaplasma phagocytophilum je obligátně intracelulární gramnegativní baktérie, patřící mezi riketsie a napadající lidské leukocyty. Anaplasma se přenáší na člověka kousnutím klíštěte, převážně klíštětem Ixodes scapularis a klíštětem Ixodes pacificus. Způsobuje lidskou granulocytární anaplasmózu (HGA), dříve známou jako lidskou granulocytární ehrlichiózu (HGE). Mezi typické příznaky patří horečka, bolest hlavy, zimnice a bolesti svalů, které se obvykle objevují během 1 - 2 týdnů po přisátí klíštěte. Epidemiologie této nákazy je velmi podobná Lymeské borelióze (způsobuje Borrelia burgdorferi) a Babesióze (způsobuje především Babesia microti) majících stejného přenašeče – klíště.

Klíšťová encefalitida (TBEV) je infekční onemocnění napadající mozek. Onemocnění se nejčastěji projevuje jako meningitida, encefalitida nebo meningoencefalitida. Onemocnění je známé u přežvýkavců, hlodavců, ptáků,šelem, koní a lidí. Přenos původců ze skupiny Flaviridae se uskutečňuje klíšťaty nebo alimentární cestou.

CE IVD